Se vi dicessimo che è possibile avere un risultato analitico sui contaminanti della birra in sole 2 ore ? Si proprio quello stesso risultato che un laboratorio di analisi ci impiega giorni se non settimane a darvi .... Ci prendereste per pazzi ?!

Sicuramente avete già sentito parlare di analisi del DNA, ma sono sicuro che nella vostra testa si apre una visione del tipo C.S.I. e super-laboratori, provette col fumo che escono ecc. Ecco forse questo è quello che ci fanno credere i film, e forse fino a poco tempo fa era una realtà poichè l' analisi del DNA era legata ad un costo veramente importante.

 

Oggi tutto è cambiato ed è diventato  SMART. Tutto comincia da una Start-up con l'idea di rendere l'analisi del DNA per l'identificazione microbica adatta a tutti. L'evoluzione dell'idea e la sua messa a punto forma i primi piccoli e portatili termociclatori (quello rappresentato nella foto a lato) controllati da pc e/o da smartphone oggi rendono possibile un analisi del DNA quasi "casalinga".

Beer Spoilage Test kit


Il KIT per l'identificazione dei contaminanti è la vera rivoluzione del sistema quì presentato. Questo perchè rispetto ad una classica elettroforesi in gel, non c'è nulla da preparare, il kit contiene già tutto. Inoltre rispetto ad  altri kit presenti sul mercato, con questo è possibile avere un risultato che comprende 6 microrganismi delle  classi più alteranti della birra:

  • Pectinatus
  • Megasphera
  • Diastaticus
  • Brettanomyces
  • Batteri Lattici
  • Batteri acetici

 

Performance Characteristics

Limit of Detection: 1 - 10 cells/mL
Sample enrichment (Optional): 24 - 48 hr
PCR operation and detection: 2 hr
Cross-reactivity: Cross-reactivity was not observed in over 90 species of bacteria and fungi closely related to beer spoilage micro-organisms and commonly associated with food.


Attenzione l'analisi del DNA non è una cosa per tutti ! Con il nostro setup abbiamo semplificato al massimo il processo di identificazione tuttavia l'attenzione da prestare durante l'analisi alle contaminazioni crociate, nonchè per l'interpretazione del risultato risulta una strumentazione "delicata". Il nostro consiglio è di renderla complementare e non totalmente sostitutiva alla classica microbiologia, più lenta, ma più facile da eseguire.


Come Funziona ?


1)

Prelievo del campione 1ml


2)

Chiudere la fialetta ed inserirla nella centrifuga.

Centrifugare per 5 min a 10000 giri/min


3)

Estrarre la fialetta ( eppendorf) dalla centrifuga e pipettare fuori il surnatante, prestando attenzione a non danneggiare il "pellet" formatosi.


4)

Risospendere il pellet con 50uL di acqua sterile. In caso di pellet cospicuo è possibile arrivare fino a 100uL di acqua .


5)

Con l'aiuto di due differenti pipette, inserire in una fialetta VUOTA, da 0,2 ml , 50uL di soluzione Buffer e 2uL di soluzione di lisi.


6)

Inserire nella fialetta da 0,2ml appena preparata 2uL di campione risospeso ed agitare.


7)

Inserire la fialetta nel termociclatore ed avviare il programma di lisi:

37°C --> 10min

99°C --> 5min

4°C (pausa)


8)

Estrarre la fialetta dal termociclatore, prelevare 25uL di campione lisato ed inserirlo nella fialetta "tap bead" (quella che contiene della polverina bianca)


9)

Agitare/vortexare la fialetta per rendere omogeneo il tutto e posizionarlo all'interno del termociclatore avviando il ciclo di amplificazione:

1 cycle: 95°C, 4 min
35 cycles: 95°C, 10 sec, 64°C, 30 sec, 72°C, 10 sec
Final: 4°C, (∞)


10)

Una volta amplificato il DNA estrarre la fialetta dal termociclatore. In una eppendorf da 1,5-2ml aggiungere 10uL di campione amplificato e 120uL di "detection reagent"


11)

Dopo aver mescolato il tutto prelevare 120uL dalla eppendorf e trasferirli su di una striscia di carta per la rilevazione dei contaminanti , dove indicato dalle frecce.


12)

Interpretazione dei risultati


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IFU-PM-02 V5.0 Beer Spoilage Test Kit[18
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